Daŭrigebla rFC-Endotoksina Analiza Kompleto por Fidinda BET - Ĉiniaj Provizantoj kaj Fabrike Atestita
Teknikaj Informoj pri Rekombina Faktoro C (rFC) Fluorometria Analizo por Detekto de Bakteriaj Endotoksinoj
La rFC-fluorimetria analizo estas senlima, in vitro metodo por kvanta bakteria endotoksino (lipopolisakarido, LPS) detekto, konforma al tutmondaj farmakopeoj (USP , EP 2.6.14). Ĝia kerna principo dependas de rekombinita Faktoro C (rFC) - rekombinita proteino realigita el la LPS-liganta domajno de hufumkrabo Faktoro C - forigante dependecon de natura hufumkraba sango kaj traktante daŭripovajn zorgojn.
Endotoksina LPS specife ligiĝas al la LPS-rekona domajno de rFC, ekigante konforman ŝanĝon kiu aktivigas la serinan proteazan agadon de rFC. La intenseco de AMC-fluoreskeco estas rekte proporcia al la endotoksina koncentriĝo en la specimeno, mezurebla per fluoreska mikroplata legilo.
Detektas endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, egalante aŭ superante tradiciajn Limulus Amebocyte Lysate (LAL) analizojn.
Tipe kovras 0,005–50 EU/mL, ebligante kvantan analizon trans larĝa koncentriĝa spektro.
Montras altan specifecon por LPS; ĝi ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj, reduktante falspozitivajn rezultojn.
Postulas kontrolitan temperaturon (37±1°C) kaj inkubacian tempon (60–120 minutoj), kun detekto je ~360 nm/~460 nm.
Preparu specimenojn (ekz., farmaciaĵojn, medicinajn aparatojn, biologiajn produktojn) per diluo aŭ ekstraktado por forigi matrican interferon.
Miksu rFC-reakciaĵon, fluorogenan substraton, kaj specimenon en mikroplata puto.
Kovu je 37 °C por ebligi LPS-rFC-ligadon, aktivigon kaj substratan fendadon.
Mezuru fluoreskan intensecon; kalkulu endotoksinan koncentriĝon uzante norman kurbon generitan per konataj endotoksinaj normoj (ekz., Escherichia coli O55:B5 LPS).
Ĉi tiu analizo kombinas daŭripovon (neniu rikoltado de hufokraboj), fidindecon (malalta interfero, alta reproduktebleco), kaj efikecon, igante ĝin ideala por kvalito-kontrolo en farmaciaj kaj bioteknologiaj industrioj.
La analizo uzas Rekombinan Faktoron C (rFC) kreitan el la hufumkrabo. Kiam endotoksino LPS ligiĝas al rFC, ĝi aktivigas sian serinan proteazan agadon, fendante fluorogenan substraton kaj generante AMC-fluoreskon proporcian al la endotoksina koncentriĝo.
La rFC-analizo povas detekti endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, kio egalas aŭ superas la sentemon de tradiciaj Limulus Amebocyte Lysate (LAL) analizoj.
Jes. La rFC-analizo havas altan specifecon por LPS kaj ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj, kiuj estas ofta fonto de falspozitiva interfero en tradiciaj LAL-ĝel-koagulaĵanalizoj.
La analizo postulas kontrolitan inkubacian temperaturon de 37±1°C dum 60 ĝis 120 minutoj. La rezulta fluoresko estas mezurata uzante ekscitajn/emisiajn ondolongojn de proksimume 360 nm/460 nm.
Ĝi taŭgas por kvalito-kontrolo de farmaciaj produktoj, medicinaj aparatoj kaj biologiaj produktoj. Specimenoj estas tipe preparitaj per diluo aŭ ekstraktado por elimini matrican interferon antaŭ testado.
Ĉar ĝi estas *in vitro* metodo kiu uzas rekombinan proteinon (rFC) anstataŭ naturan sangon de hufumkrabo. Tio forigas la bezonon de hufumkraba rikoltado, traktante zorgojn pri ekologia daŭripovo.