Daŭrigebla rFC-Endotoksina Analiza Kompleto de Ĉiniaj Provizantoj: Fidinda BET-Solvo por Fabriko de Farmaciaĵoj kaj Medicinaj Aparatoj
Teknikaj Informoj pri Rekombina Faktoro C (rFC) Fluorometria Analizo por Detekto de Bakteriaj Endotoksinoj
Endotoksina LPS specife ligiĝas al la LPS-rekona domajno de rFC, ekigante konforman ŝanĝon kiu aktivigas la serinan proteazan agadon de rFC. La intenseco de AMC-fluoreskeco estas rekte proporcia al la endotoksina koncentriĝo en la specimeno, mezurebla per fluoreska mikroplata legilo.
Detektas endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, egalante aŭ superante tradiciajn Limulus Amebocyte Lysate (LAL) analizojn.
Tipe kovras 0,005–50 EU/mL, ebligante kvantan analizon trans larĝa koncentriĝa spektro.
Montras altan specifecon por LPS; ĝi ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj, reduktante falspozitivajn rezultojn.
Postulas kontrolitan temperaturon (37±1°C), inkubacian tempon (60–120 minutoj), kaj ondolongojn de ~360 nm/~460 nm.
Preparu specimenojn (ekz., farmaciaĵojn, medicinajn aparatojn, biologiajn produktojn) per diluo aŭ ekstraktado por forigi matrican interferon.
Miksu rFC-reakciaĵon, fluorogenan substraton, kaj specimenon en mikroplata puto.
Kovu je 37 °C por ebligi LPS-rFC-ligadon, aktivigon kaj substratan fendadon.
Mezuru fluoreskan intensecon; kalkulu endotoksinan koncentriĝon uzante norman kurbon generitan per konataj endotoksinaj normoj (ekz., Escherichia coli O55:B5 LPS).
Ĉi tiu analizo kombinas daŭripovon (neniu rikoltado de hufokraboj), fidindecon (malalta interfero, alta reproduktebleco), kaj efikecon, igante ĝin ideala por kvalito-kontrolo en farmaciaj kaj bioteknologiaj industrioj.
D: Kio estas Rekombina Faktoro C (rFC)?
Rekombinita Faktoro C (rFC) estas in vitro alternativo por endotoksindetekto. Ĝi estas rekombinita proteino realigita el la LPS-liganta domajno de hufumkrabo Faktoro C, eliminante la bezonon rikolti naturan hufumkraban sangon.
D: Kiom sentema estas la rFC-fluorimetria analizo?
La analizo estas tre sentema, kun la kapablo detekti bakteriajn endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL. Ĉi tio egalas aŭ superas la rendimenton de tradiciaj analizoj de Limulus Amebocyte Lysate (LAL).
D: Ĉu la rFC-analizo suferas de interfero de beta-glukanoj?
Ne. La rFC-analizo havas altan specifecon por LPS kaj ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj, kiuj estas oftaj fontoj de interfero kaj falspozitivaj rezultoj en tradiciaj LAL-ĝel-koagulaĵanalizoj.
D: Kiuj estas la normaj inkubaciaj parametroj por la analizo?
La analizo postulas kontrolitan inkubacian temperaturon de 37±1°C dum 60 ĝis 120 minutoj. La fluoreska intenseco estas poste mezurata je ekscitaj/emisiaj ondolongoj de proksimume 360 nm/460 nm.
D: Ĉu la rFC-analizo konformas al tutmondaj farmakopeoj?
Jes, la rFC-fluorometra analizo estas agnoskita kaj konformas al gravaj tutmondaj farmakopeoj, inkluzive de USP kaj EP 2.6.14, por kvanta detekto de bakteriaj endotoksinoj.