Daŭrigebla rFC-Endotoksina Analiza Kompleto: Fidinda BET-Solvo de Ĉiniaj Provizantoj kaj Fabriko
Teknikaj Informoj pri Rekombina Faktoro C (rFC) Fluorometria Analizo por Detekto de Bakteriaj Endotoksinoj
La rFC-fluorimetria analizo estas senlima, in vitro metodo por kvanta bakteria endotoksino (lipopolisakarido, LPS) detekto, konforma al tutmondaj farmakopeoj (USP , EP 2.6.14). Ĝia kerna principo dependas de rekombinita Faktoro C (rFC) - rekombinita proteino realigita el la LPS-liganta domajno de hufumkrabo Faktoro C - forigante dependecon de natura hufumkraba sango kaj traktante daŭripovajn zorgojn.
1. Analiza Principo
Endotoksina LPS specife ligiĝas al la LPS-rekona domajno de rFC, ekigante konforman ŝanĝon kiu aktivigas la serinan proteazan agadon de rFC. La intenseco de AMC-fluoreskeco estas rekte proporcia al la endotoksina koncentriĝo en la specimeno, mezurebla per fluoreska mikroplata legilo.
2. Ŝlosilaj Teknikaj Parametroj
- Sentemo: Detektas endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, egalante aŭ superante tradiciajn Limulus Amebocyte Lysate (LAL) analizojn.
- Lineara Gamo: Tipe kovras 0,005–50 EU/mL, ebligante kvantan analizon trans larĝa koncentriĝa spektro.
- Specifeco: Montras altan specifecon por LPS; ĝi ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj (ofta interfero en LAL-ĝel-koagulaĵaj analizoj), reduktante falspozitivajn rezultojn.
- Inkubaciaj Kondiĉoj: Postulas kontrolitan temperaturon (37±1°C) kaj inkubacian tempon (60–120 minutoj), kun fluoreskeco mezurata ĉe ekscitaj/emisiaj ondolongoj de ~360 nm/~460 nm.
3. Superrigardo de la laborfluo
- Preparu specimenojn (ekz., farmaciaĵojn, medicinajn aparatojn, biologiajn produktojn) per diluo aŭ ekstraktado por forigi matrican interferon.
- Miksu rFC-reakciaĵon, fluorogenan substraton, kaj specimenon en mikroplata puto.
- Kovu je 37 °C por ebligi LPS-rFC-ligadon, aktivigon kaj substratan fendadon.
- Mezuru fluoreskan intensecon; kalkulu endotoksinan koncentriĝon uzante norman kurbon generitan per konataj endotoksinaj normoj (ekz., Escherichia coli O55:B5 LPS).
Ĉi tiu analizo kombinas daŭripovon (neniu rikoltado de hufokraboj), fidindecon (malalta interfero, alta reproduktebleco), kaj efikecon, igante ĝin ideala por kvalito-kontrolo en farmaciaj kaj bioteknologiaj industrioj.