Daŭrigebla rFC Endotoksina Analiza Kompleto - Fidinda BET-Testado de Ĉiniaj Provizantoj kaj Fabriko
Teknikaj Informoj pri Rekombina Faktoro C (rFC) Fluorometria Analizo por Detekto de Bakteriaj Endotoksinoj
La rFC-fluorimetria analizo estas senlima, in vitro metodo por kvanta bakteria endotoksino (lipopolisakarido, LPS) detekto, konforma al tutmondaj farmakopeoj (USP , EP 2.6.14). Ĝia kerna principo dependas de rekombinita Faktoro C (rFC) - rekombinita proteino realigita el la LPS-liganta domajno de hufumkrabo Faktoro C - forigante dependecon de natura hufumkraba sango kaj traktante daŭripovajn zorgojn.
1. Analiza Principo
Endotoksina LPS specife ligiĝas al la LPS-rekona domajno de rFC, ekigante konforman ŝanĝon kiu aktivigas la serinan proteazan agadon de rFC. La intenseco de AMC-fluoreskeco estas rekte proporcia al la endotoksina koncentriĝo en la specimeno, mezurebla per fluoreska mikroplata legilo.
2. Ŝlosilaj Teknikaj Parametroj
- Sentemo: Detektas endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, egalante aŭ superante tradiciajn Limulus Amebocyte Lysate (LAL) analizojn.
- Lineara Gamo: Tipe kovras 0,005–50 EU/mL, ebligante kvantan analizon trans larĝa koncentriĝa spektro.
- Specifeco: Montras altan specifecon por LPS; ĝi ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj (ofta interfero en LAL-ĝel-koagulaĵaj analizoj), reduktante falspozitivajn rezultojn.
- Inkubaciaj Kondiĉoj: Postulas kontrolitan temperaturon (37±1°C) kaj inkubacian tempon (60–120 minutoj), kun fluoreskeco mezurata ĉe ekscitaj/emisiaj ondolongoj de ~360 nm/~460 nm.
3. Superrigardo de la laborfluo
- 1Preparu specimenojn (ekz., farmaciaĵojn, medicinajn aparatojn, biologiajn produktojn) per diluo aŭ ekstraktado por forigi matrican interferon.
- 2Miksu rFC-reakciaĵon, fluorogenan substraton, kaj specimenon en mikroplata puto.
- 3Kovu je 37 °C por ebligi LPS-rFC-ligadon, aktivigon kaj substratan fendadon.
- 4Mezuru fluoreskan intensecon; kalkulu endotoksinan koncentriĝon uzante norman kurbon generitan per konataj endotoksinaj normoj (ekz., Escherichia coli O55:B5 LPS).
Ĉi tiu analizo kombinas daŭripovon (neniu rikoltado de hufokraboj), fidindecon (malalta interfero, alta reproduktebleco), kaj efikecon, igante ĝin ideala por kvalito-kontrolo en farmaciaj kaj bioteknologiaj industrioj.
Oftaj Demandoj (Oftaj Demandoj)
Kio estas la analizo de Rekombina Faktoro C (rFC)?
La rFC-analizo estas moderna, sen hufumkraboj, in vitro metodo uzata por kvanta detekto de bakteriaj endotoksinoj (lipopolisakaridoj). Ĝi servas kiel ekologie amika alternativo al tradiciaj LAL-analizoj.
Ĉu la rFC-analizo konformas al internaciaj farmakopeoj?
Jes, la rFC-fluorometra analizo estas agnoskita kaj konforma al gravaj tutmondaj farmakopeoj, inkluzive de USP kaj EP 2.6.14, por endotoksina testado.
Kiom sentema estas la rFC-fluorimetria analizo?
La analizo estas tre sentema, kapabla detekti bakteriajn endotoksinojn je koncentriĝoj tiel malaltaj kiel 0.005 EU/mL, kio egalas aŭ superas la efikecon de tradiciaj LAL-metodoj.
Ĉu la rFC-analizo produktas falspozitivajn rezultojn de glukanoj?
Ne. Male al tradiciaj LAL-analizoj, la rFC-analizo montras altan specifecon por LPS kaj ne estas aktivigita per (1→3)-β-D-glukanoj, signife reduktante falspozitivajn rezultojn.
Kiuj estas la normaj inkubaciaj parametroj por la analizo?
La analizo postulas inkubacion je kontrolita temperaturo de 37±1°C dum 60 ĝis 120 minutoj. Fluoreska intenseco estas poste mezurata je ondolongoj de proksimume ~360 nm (ekscito) kaj ~460 nm (emisio).